Čo je bakteriologický výskum? Podľa akej schémy sa vykonáva? Čo v tomto prípade znamená bezpečnosť? Aké sú ciele a fázy bakteriologického výskumu?
Všeobecné informácie
Bakteriologické vyšetrenie je vedecký proces, pri ktorom sa identifikujú baktérie a študujú sa ich vlastnosti s cieľom stanoviť mikrobiologickú diagnózu. Veľký význam tu má určenie typu alebo druhu výsledného mikroorganizmu (predpokladá sa čistá kultúra). To je sprevádzané štúdiom biochemických a fyziologických vlastností organizmov, ako aj tendenciou k tvorbe toxínov. Na tieto účely sa používajú zrážacie a aglutinačné reakcie. Praktizuje sa aj infikovanie laboratórnych zvierat s následným odhalením patologických zmien.
Práca s testovacím materiálom
Algoritmus bakteriologickej štúdie zabezpečuje prísne dodržiavanie špeciálnych pokynov. Testovaný materiál sa teda musí zbierať do sterilných misiek za aseptických podmienok. Tiež je potrebné sa staraťčo najskôr zabezpečiť doručenie do laboratória. Skladovanie vzoriek v chlade je žiaduce. Technika bakteriologického výskumu poskytuje mnoho možných situácií. Typ objektu, vlastnosti mikroorganizmu a povaha ochorenia si teda často vyžadujú vypracovanie individuálnych pokynov na prácu. V práci sa používa veľké množstvo rôznych metód. Jednou z najbežnejších je bakterioskopia. Ale ak baktérie nie sú fixované, potom sa použije rozdrvená alebo visiaca kvapka. Treba poznamenať, že posledné dve možnosti sa vyznačujú zvýšenou úrovňou nákazlivosti.
Bakterioskopia
V tomto prípade sa používajú ťahy. Aby ste ich vytvorili, musíte rozložiť kvapku skúmanej kvapaliny na povrch podložného skla. Zates by to mal vysušiť. Často sa to robí pohybom lieku cez plameň získaný z plynového horáka. Aj keď ako alternatívu možno použiť upevňovacie zlúčeniny. Na označenie toho, že s týmto prípravkom boli vykonané prípravné akcie, je zafarbený. Účelom takejto manipulácie je presnosť, ktorá je veľmi dôležitá pri mikroskopickom a bakteriologickom vyšetrení. Ak totiž liek znova použijete na iný účel, získate kašu, s ktorou sa bude efektívne pracovať len veľmi ťažko.
Prečo je bakterioskopia taká populárna
V neposlednom rade kvôli dostupnosti tejto metódy. Ak sa vykoná bakteriologická štúdia čerstvého prípravku, potom na určenie patogénumožno použiť mikrochemické reakcie alebo selektívne farbenie rôznych štruktúrnych častí mikroorganizmu. Ktorý je lepší? Presnejší výsledok je možné získať pri práci s farebným prípravkom. V tomto prípade sa testovaný materiál nanesie na vopred pripravené podložné sklíčko. A nezabudnite na tenkú (a ak je to možné rovnomernú) vrstvu. Potom musíte počkať, kým liek nezaschne na vzduchu. Mikroorganizmy sa potom fixujú pomocou jednej z bežných metód. Potom sa ochladený prípravok podrobí farbeniu diferenciálnou alebo jednoduchou farbou. Na tento účel možno použiť suché a natívne prípravky. Potom zostáva nasmerovať ultrafialové alebo krátke modré lúče do miesta hromadenia organizmov, čím sa celý mikrób alebo určité časti jeho tela rozžiaria.
Praktická aplikácia bakterioskopie
Používa sa na diagnostiku množstva infekčných chorôb. Najznámejšie z nich sú tuberkulóza, kvapavka a recidivujúca horúčka. Okrem toho sa uchyľujú k výskumu, aby študovali celý komplex mikroflóry orgánu alebo produktu. Kritici však často poukazujú na relatívnu nespoľahlivosť a nepresnosť tejto metódy.
Plodiny a subkultúry bakteriálnych kultúr
Vykonajte ich pomocou Pasteurovej pipety. Uskutočnenie bakteriologického a cytologického vyšetrenia je často ťažké uskutočniť bez očkovania a subkultivácie počas pracovného postupu. Pri práci s Pasteurovou pipetou jej hrotodlomiť pinzetou. Samotný nástroj sa potom prenesie cez plameň horáka a potom sa nechá vychladnúť. Mimochodom, na siatie možno použiť tekuté aj tuhé živné pôdy. Výber je ovplyvnený tým, aké ciele bakteriologického výskumu sa sledujú. Zároveň je potrebné dodržiavať algoritmus práce a bezpečnostné opatrenia. Takže pri práci s tekutým živným médiom je potrebné zabezpečiť, aby nevytieklo a nezmáčalo okraje korku a skúmaviek. Keď sa štúdia uskutočňuje s pevným materiálom, na vstup do kultúry sa často používa špeciálna ihla. Keď sa siatie a opätovný výsev vykonáva, mali by sa vykonávať v blízkosti plameňa plynového horáka. Kvôli čistote experimentu by skúmavka nemala zostať dlho otvorená. Pokiaľ ide o nástroj s kultúrou: mali by ste sa uistiť, že sa ničoho nedotýka. Technika bakteriologického výskumu tiež umožňuje spálenie okrajov skúmavky pred jej uzavretím. Hotový produkt by mal byť podpísaný ihneď po výrobe, aby sa predišlo budúcim nejasnostiam.
Účinnosť výsevu
Verí sa, že táto metóda umožňuje získať presnejšie a spoľahlivejšie údaje počas bakteriologickej diagnostiky ako predtým zvažovaná bakterioskopia. V tomto prípade je algoritmus akcií nasledujúci:
- Na začiatku sa čistá kultúra rozotrie po povrchu živnej pôdy, ktorá sa naleje do Petriho misky.
- Počiatočný výsev by sa mal vykonávať v podmienkach, ktoré sú priaznivé pre daný druhmikroorganizmy.
- Po dni alebo dvoch, za prítomnosti optimálneho prostredia, sa všetky vhodné kolónie presunú tam, kde sa môžu maximálne rozvinúť. To ich oslobodzuje od cudzej mikroflóry.
Konečným výsledkom je kultúra homogénnych baktérií, ktorú možno identifikovať.
Čisté kultúry
Ale ako sa vyrábajú? Na tento účel sa používajú biologické a mechanické metódy. V prvom prípade veľkú úlohu zohrávajú živné médiá, kde sú potrebné podmienky priaznivé pre rozvoj konkrétnej kultúry. Tento prístup možno použiť aj vtedy, keď sa infikujú laboratórne zvieratá vnímavé na určitý typ baktérií. Mechanické metódy sú založené na použití sterilného nástroja, pomocou ktorého sa kultúra umiestni do živného média umiestneného v prvej, druhej a tretej Petriho miske. Potom je potrebné počkať, kým vyrastú jednotlivé kolónie a už z nich vynikne čistá kultúra. Baktérie sa dajú pestovať aj v špeciálnych termostatoch, kde sa teplota udržiava na určitej úrovni (zvyčajne okolo 37 stupňov). V tomto prípade proces pokračuje asi deň. V závislosti od typu mikroorganizmov však môžu byť stanovené aj iné pojmy. Dôležitá je aj prítomnosť požadovanej koncentrácie kyslíka. Na tento účel použite rôzne spôsoby prevzdušňovania. Doteraz sme hovorili o situácii ako celku a celkovo, no teraz zamerajme svoju pozornosť na to, aká je schéma bakteriologického výskumu.
Cvičenie
Na detekciu patogénnych mikroorganizmov v tele pacienta alebo potenciálneho nosiča sa často používa súbor metód. Použité materiály a metódy závisia od cieľov analýzy, ako aj od podmienok prostredia, v ktorom sa práca vykonáva. V praxi sa baktérie najčastejšie zisťujú prostredníctvom hemokultúr odobratých od človeka alebo zvieraťa. Ak sú lokálne lézie dobre definované, v problémových oblastiach možno hľadať patogény. To je typické pre také ochorenia, ako je úplavica, kvapavka, záškrt a mnohé iné. V obzvlášť závažných prípadoch je tento proces rozdelený na samostatné štádiá bakteriologického vyšetrenia (ktoré je typické pre týfus). Každý z nich používa svoje vlastné metódy, ktoré sú zamerané na zistenie pôvodcu infekcie. Pozrime sa bližšie na situáciu s brušným týfusom. V prvom týždni ochorenia sú najspoľahlivejším spôsobom diagnostiky ochorenia hemokultúry. Po druhé, sérologická štúdia sa považuje za takúto. V treťom týždni sa vyšetruje stolica. Za posledný spôsob sa považuje kontrola rekonvalescentov.
Identifikácia mikroorganizmov
Začína to procesom farbenia. Potom sa pozerajú na to, ako môže baktéria rozkladať sacharidy, aminokyseliny atď. Okrem toho môže byť tento proces doplnený štúdiom ďalších vlastností, ktoré má každý jednotlivý rod alebo druh mikroorganizmov. Ako príklad treba uviesť možnosti rozpúšťania erytrocytov rôznych zvierat, vplyv na koaguláciu krvnej plazmy a rozpúšťanie zrazenín.fibrín a tak ďalej. To všetko sú rozdielne znaky jednotlivých predstaviteľov mikrosveta. Na konečné rozpoznanie sa môže použiť aj sérologická identifikácia (zvyčajne sa to však týka patogénnych baktérií, ktoré patria do čeľade čriev).
Záver
Treba poznamenať, že množstvo mikroorganizmov nemožno identifikovať metódami opísanými v článku. V tomto prípade sa široko používa prax infikovania laboratórnych zvierat. Výpočet sa robí na základe skutočnosti, že sa objaví charakteristická toxigenita alebo patogenita, ktorá sa v umelých podmienkach nepozoruje. Infekcia môže byť tiež použitá ako metóda na akumuláciu patogénnych mikróbov. A už keď sa porovnávajú charakteristiky študovanej kultúry, zistené v procese štúdia biologických, morfologických, sérologických a biochemických vlastností, môžeme povedať, že je známe, s akými mikróbmi máme do činenia. Identifikácia znamená označenie rodu, druhu a typu baktérie. Ak sa skúmaný mikroorganizmus v určitých vlastnostiach odchyľuje od svojej typickej charakteristiky, musí sa to uviesť. Viacerí odborníci sa domnievajú, že v takýchto prípadoch bude užitočné znovu sa stotožniť s duplikáciou všetkých použitých metód a techník. Niekedy možno výskum posunúť na ďalšiu úroveň, čo si vyžaduje serióznejší (a nákladnejší) prístup. Ak boli získané negatívne výsledky, znamená to, že prípravokmikroorganizmy chýbali alebo neboli životaschopné. Ale pre presnosť výskumu, ak existuje podozrenie na množstvo bacilonosičov (dyzentéria, záškrt, brušný týfus), v takýchto prípadoch sa zobrazujú opakované kontroly. Je to potrebné, aby mali špecialisti presnú predstavu o tom, s čím sa musia vysporiadať.
