Aglutinácia krvi je aglutinácia a sedimentácia červených krviniek, baktérií a iných buniek, ktoré nesú antigény.
Proces prebieha pod vplyvom aglutinínov, čo sú špecifické látky. Ako tieto látky pôsobia lektíny alebo protilátky.
Možné typy aglutinácie pri určovaní krvnej skupiny
Aglutinácia je špecifická a nešpecifická. V prvom prípade reakcia prebieha za účasti troch zložiek:
- antigény;
- protilátky;
- elektrolyty (použite izotonický roztok).
Pri určovaní krvnej skupiny sa používajú všetky možné typy aglutinácie, no nie je to jediný prípad.
Na aký účel sa používa?
Aglutinačný test krvi sa používa na identifikáciu pôvodcu infekčného ochorenia. Zároveň sa usadzuje a v sedimente je ľahké ho odhaliť. Tento proces sa využíva, ako už bolo spomenuté vyššie, pri určovaní krvnej skupiny. O tom budeme diskutovať ďalej.
Aké sú funkcie?
Erytrocyty obsahujú antigény typu A a B. Súviažu sa na protilátky ά a β, v tomto poradí. Krvné skupiny a aglutinačné reakcie:
- 1, 0 (ά, β) – žiadne antigény na povrchu erytrocytov;
- 2, A (β) – prítomný antigén A a protilátka β;
- 3, B (ά) – obsahuje antigén B a protilátku ά;
- 4, AB (00) – prítomné dva antigény, žiadne protilátky.
Za zmienku stojí, že antigény sú pozorované už v embryu. Čo sa týka protilátok, objavujú sa po narodení, v prvom mesiaci života.
Znášanlivosť ľudí závisí od krvnej skupiny. To je dôvod odmietnutia plodu telom matky. Inými slovami, má protilátky proti krvným antigénom nenarodeného dieťaťa. V tomto prípade dochádza k nekompatibilite. Okrem toho sa pri transfúzii musí brať do úvahy krvná skupina.
Príprava
Krvné skupiny a aglutinačné reakcie sú kompatibilné pojmy, ktoré sa často používajú v medicíne.
Pred testom je dôležité dodržiavať určité pokyny. Je potrebné dočasne vylúčiť používanie niektorých potravín a liekov. Pomôže to spresniť výsledky. Odporúčania, ktoré treba dodržiavať, predpisuje lekár. Faktom je, že rôzne laboratóriá nemusia mať rovnaké rozsahy získaných hodnôt, to znamená, že sa mierne líšia.
Testovacie podmienky
Pre presné určenie krvnej skupiny je dôležité vybrať si správne vybavenie. Patria sem:
- fyziologický roztok a pipeta;
- sklenené tyče;
- štandardné izohemaglutinačné séra;
- suché hlinené taniere, ktoré sú rozdelené do 4 sektorov.
Na podmienky testu sa vzťahujú požiadavky:
- daylight;
- izbová teplota nad +16 ˚С;
- použitie objemov krvi a séra v pomere 1:10;
- Spoľahlivé výsledky do 5 minút.
Vyššie uvedené sú hlavné podmienky a nástroje. Krvnú aglutináciu možno vykonať niekoľkými spôsobmi a každý z nich kladie individuálne požiadavky.
Metódy
Možné metódy na určenie krvnej skupiny pomocou aglutinácie:
- štandardná metóda;
- cross-reaction;
- použitie tsoliclones;
- expresná metóda pomocou sady „Erythrotest-Groupcard“.
Štandardná metóda
Aglutinácia krvi sa prejavuje pomocou červených krviniek pacienta. Používajú sa aj štandardné séra, ktoré obsahujú známe antigény.
Jedna kvapka štyroch sér sa umiestni na rovnú doštičku. Potom sa naň pomocou sklenených tyčiniek nanesie vyšetrovaná krv pacienta. V tomto prípade je vhodné použiť kvapkadlá. Pomer by mal byť 1:10. Sérum a krv sa jemne zmiešajú. Vyhodnotenie je možné vykonať do piatich minút.
Dešifrovanie výsledkov testov jednoduchou metódou
Po určenom časev kvapkách séra sa pozoruje osvietenie. V niektorých môžete vidieť, že došlo k aglutinácii erytrocytov (malé vločky), v iných chýba.
Existujú nasledujúce možnosti:
- žiadna reakcia vo všetkých vzorkách séra − 1 skupina;
- zrážanie sa vyskytlo všade okrem 2. vzorky - skupina 2;
- žiadna reakcia iba v 3. vzorke - 3. skupina;
- aglutinácia sa vyskytla všade – skupina 4.
Hlavná vec je teda správne rozloženie séra. Potom nebude ťažké rozlúštiť výsledok. Ak je aglutinácia krvi slabá, odporúča sa zopakovať test. V prípade malých vločiek sa skúmajú pod mikroskopom.
Krížová reakcia
Niekedy je nemožné presne určiť krvnú skupinu jednoduchým spôsobom. Aglutinácia sa v tomto prípade uskutočňuje pomocou metódy krížovej reakcie. Na rozdiel od prvej verzie testu sú tu dôležité štandardné erytrocyty. Krv pacienta sa odoberie do skúmavky, odstredí sa a potom sa sérum odčerpá pipetou na ďalší výskum.
Položí sa na tanier v množstve 2 kvapiek, potom sa k nemu pridajú štandardné červené krvinky skupiny A a B. Obsah sa premieša trepaním nádoby.
Výsledky metódy krížovej reakcie
Po piatich minútach sú vzorky pripravené na kontrolu. Možnosti sú:
- zlepenie sa vyskytlo v oboch kvapkách – 1 skupina;
- vločky nie súpozorované v žiadnej vzorke – skupina 4;
- proces je viditeľný v jednej vzorke - 2 alebo 3 skupiny (v závislosti od toho, kde presne sa krv zrazila).
Coliclon metóda
Na určenie krvnej skupiny sa aglutinácia týmto spôsobom vykonáva pomocou syntetických náhrad séra. Nazývajú sa tsoliklones. Obsahujú umelé náhrady za ά a β-aglutíny známe ako erytrotesty (ružové a modré). Reakcia prebieha medzi nimi a červenými krvinkami pacienta.
Táto metóda je najpresnejšia a najspoľahlivejšia. V zásade nevyžaduje opätovné vyšetrenie. Vyhodnotenie výsledkov sa vykonáva rovnakým spôsobom ako v prípade štandardnej metódy. Zvláštnosťou je, že štvrtá krvná skupina musí byť nevyhnutne potvrdená reakciou so špecifickou syntetickou náhradou (anti-AB). Okrem toho nevykazuje lepenie, keď sa pridá roztok chloridu sodného.
Expresná metóda so sadou „skupinových kariet Erythrotest“
Vzhľadom na možné metódy analýzy pri určovaní krvnej skupiny stojí za zmienku, že táto metóda má svoje vlastné charakteristiky. Spočívajú v tom, že výsledok sa dá vyhodnotiť nielen v laboratóriu, ale aj v teréne. Na štúdium sa používa špeciálna súprava. Zahŕňa kartu jamky so sušenými činidlami, ktoré sú už prítomné na dne. Okrem anti-AB, anti-A a anti-B sa na stanovenie Rh faktora používa aj anti-D.
Táto metóda nevyžaduje špeciálnu prípravu, je povolené používať krv odobranú z prsta, je povolená prítomnosť konzervačných látok v nej. Najprv musíte do každej jamky pridať kvapku vody, aby sa ingrediencie rozpustili. Potom sa pridá krv, mierne premiešaná. Do troch minút dostanete výsledok.
Falošná aglutinácia
Údaje získané po teste niekedy nie sú pravdivé. Tento jav závisí od určitých faktorov.
Existujú tri typy falošnej reakcie:
- Pseudoaglutinácia. Skutočná väzba sa nevyskytuje, erytrocyty sa jednoducho zložia vo forme stĺpcov mincí. Ak pridáte pár kvapiek fyziologického roztoku, rozpadnú sa. Podobný jav je rozpoznaný pod mikroskopom.
- Studená aglutinácia krvi. Takáto reakcia sa pozoruje, ak boli podmienky pre štúdiu nepriaznivé. Keď je teplota nižšia ako +16˚C, môže dôjsť k lepeniu.
- Panaaglutinácia. Ak je v krvi infekcia, výsledky testov môžu byť falošné. Tento jav je možný aj v prípade onkologických ochorení, so sepsou.
Aglutinácia je v medicíne veľmi dôležitá. Umožňuje nielen určiť krvnú skupinu, ale aj identifikovať pôvodcu chorôb, ako aj prítomnosť infekcií. Hlavnou vecou je dodržiavať odporúčania lekára pri príprave na tento postup. Pokiaľ ide o zdravotnícky personál, ich úlohou je vytvárať priaznivé podmienky adodržiavanie všetkých pravidiel. Toto je jediný spôsob, ako dosiahnuť presné výsledky pri vykonávaní krvnej aglutinácie.
