Čo je ELISA? Metóda ELISA: podstata, princíp, nevýhody

Obsah:

Čo je ELISA? Metóda ELISA: podstata, princíp, nevýhody
Čo je ELISA? Metóda ELISA: podstata, princíp, nevýhody

Video: Čo je ELISA? Metóda ELISA: podstata, princíp, nevýhody

Video: Čo je ELISA? Metóda ELISA: podstata, princíp, nevýhody
Video: Tronwind Gynecology Exam Chair TRW04 2024, Septembra
Anonim

Na komplexné posúdenie stavu organizmu sa používa diagnostická metóda ELISA. Krvný test ELISA je určený na diagnostiku infekčných, hematologických, primárnych a sekundárnych imunodeficiencií.

Čo je analýza ELISA

Mnohí pacienti sa zaujímajú o metódu ELISA: čo to je, na čo je štúdia. Enzýmová imunoanalýza sa začala používať relatívne nedávno. Spočiatku sa používal na štúdium antigénnych štruktúr a vykonával sa iba na vedecké účely. Potom vedci dospeli k záveru, že pomocou enzýmov je možné identifikovať špecifické protilátky, ktoré vznikajú ako odpoveď na prebiehajúcu chorobu.

ifa metóda
ifa metóda

Spočiatku túto techniku používali len úzkoprofilové zdravotnícke zariadenia, najmä na transfúznych staniciach krvi. Zvlášť dôležitá je metóda ELISA na zisťovanie infekcie HIV.

Dnes má táto metóda široký záber. Moderné laboratóriá ho používajú na diagnostiku:

  • tumory;
  • hormonálne poruchy;
  • infekcie;
  • chronické alebo minulé infekčné procesy;
  • helminths.

Ak je v teledôjde k infekčnému procesu, vtedy sa tento typ diagnózy považuje za najoptimálnejší na určenie typu ochorenia.

Podstata metódy a jej typy

Metóda ELISA – čo to je, čo je podstatou tohto typu výskumu? Táto a mnohé ďalšie otázky zaujímajú pacientov. Základom tejto diagnostickej metódy je väzba imunitných buniek organizmu na antigény infekčných agens. Výsledný komplex sa stanoví pomocou špeciálneho enzýmu.

ifa metóda čo to je
ifa metóda čo to je

Aby ste pochopili princíp metódy ELISA, musíte vedieť, ako funguje reakcia antigén-protilátka. Antigén je molekula proteínu cudzia pre telo, ktorá vstupuje spolu s infekciou. Za antigény sa považujú aj častice cudzej krvi, ktoré sa nezhodujú v skupine. V organizme vyvolávajú imunitnú odpoveď zameranú na ochranu pred cudzorodými látkami. Preto ľudské telo produkuje protilátky - imunoglobulíny, ktoré sa môžu naviazať na antigény a vytvoriť tak imunitný komplex. Takéto zlúčeniny sú oveľa ľahšie rozpoznateľné a zničené imunitnými bunkami.

Reakcia na prítomnosť takýchto imunitných komplexov sa vykonáva v laboratóriu s použitím hotových zlúčenín, aby sa zistilo, či sú podobné v krvi.

Podstata metódy ELISA je pomerne jednoduchá, avšak vzhľadom na to, že sa vykonáva krvný test na zistenie mnohých infekcií a chorôb, existuje niekoľko jej odrôd. Každá sa líši v schéme správania a rozsahu. Môže to byť priama alebo nepriama ELISA. Priama metóda znamená, že sa používajú imobilizované protilátky,reakcie s antigénmi. Hlavnou výhodou tejto metódy je, že všetky procesy je možné automatizovať, čo znamená, že diagnostika zaberie trochu času.

Nepriama metóda znamená, že sa používajú sekundárne protilátky. A na pevnej fáze je antigén imobilizovaný. Analýza vám umožňuje určiť protilátky proti rôznym antigénom. Pomáha to dosiahnuť presnejší výsledok, ale metóda je komplikovaná.

Výhody výskumu

Laboratórne štúdie pomocou ELISA majú oproti iným diagnostickým metódam mnoho výhod. Medzi hlavné patria:

  • vysoká citlivosť;
  • stabilita pri skladovaní ingrediencií;
  • rýchlosť diagnostiky;
  • môže použiť malé množstvo testovacieho materiálu;
  • je možné automatizovať všetky procesy;
  • infekciu je možné odhaliť v najskorších štádiách.
podstata metódy if
podstata metódy if

Táto diagnostická metóda je univerzálna, preto vhodná na hromadné vyšetrenie. Pomocou analýzy je možné sledovať dynamiku infekčného procesu.

Indikácie pre analýzu a odber vzoriek materiálu

Štúdia využívajúca metódu ELISA môže byť predpísaná pre podozrenie na mnohé choroby:

  • akútne a chronické infekcie, pohlavné choroby;
  • prítomnosť parazitov;
  • autoimunitné patológie;
  • onkologické ochorenia;
  • na určenie hladiny hormónov.

Pre prítomnosť protilátokvyšetruje sa venózna krv. Pred analýzou sa z nej izolujú prvky, ktoré môžu skomplikovať štúdiu. Môžu sa odobrať aj iné biologické tekutiny.

pomocou metódy if
pomocou metódy if

Na získanie čo najpresnejších informácií sa krv odoberá nalačno. Ak bol postup predpísaný na určenie latentnej infekcie, niekoľko týždňov pred analýzou by ste mali prestať užívať antibakteriálne a antivírusové lieky. V závislosti od vybavenia laboratória, kde bol materiál odobratý, je možné výsledok získať do jedného dňa. V núdzových prípadoch sa tento čas skráti na niekoľko hodín.

Test na syfilis

Použitie metódy ELISA pomáha určiť prítomnosť mnohých infekcií v tele, najmä syfilisu. Pre štúdiu sa krv odoberá z žily na prázdny žalúdok. Potom sa vykoná štúdia, ktorá pomáha určiť nielen prítomnosť choroby v tele, ale aj presné načasovanie jej nástupu, pretože v priebehu choroby sú niektoré protilátky nahradené inými v presne definovanom poradí.

V akútnej fáze naznačujúcej predĺžený priebeh ochorenia alebo počas exacerbácie chronickej infekcie sa v krvi zistia imunoglobulíny typu M. Prítomnosť imunoglobulínov typu A naznačuje, že infekcia žije v telo dlhšie ako 4 týždne. Imunoglobulíny skupiny G označujú výšku ochorenia alebo predchádzajúcu liečbu.

princíp metódy ifa
princíp metódy ifa

Podľa stupňa zafarbenia otvorov sa posudzuje intenzita infekčného procesu, tzv.ako jeho saturácia závisí od množstva vytvorených imunitných komplexov.

HIV test

Metóda ELISA sa používa aj na testovanie infekcie HIV. Diagnóza má v tomto prípade určité znaky, ktoré sú spojené s priebehom a progresiou ochorenia. Táto výskumná metóda sa považuje za najprijateľnejšiu na stanovenie, mala by sa však vykonať najskôr mesiac po vystavení rizikovým faktorom. Je to spôsobené prítomnosťou inkubačnej doby, ktorá trvá od 45 dní do 6 mesiacov. Preto je potrebné analýzu zopakovať o šesť mesiacov.

Za pozitívny výsledok sa považuje, ak boli počas úvodného vyšetrenia zistené protilátky. V tomto prípade sa analýza opakuje po šiestich mesiacoch, ak je výsledok opäť pozitívny, potom sa štúdia vykonáva pomocou vysoko špecifických testovacích systémov.

Analýza na parazity

Pomerne často lekári predpisujú enzýmový imunotest na určenie prítomnosti parazitov v tele. Pomocou tejto výskumnej metódy môžete určiť:

  • ascariasis;
  • giardiáza;
  • toxoplazmóza a iné
nevýhody metódy ifa
nevýhody metódy ifa

Krvná diagnostika ELISA sa používa na detekciu parazitov a ich odpadových produktov, ako aj imunoglobulínov. Účinnosť tejto metódy je 90% a pomáha sledovať dynamiku vývoja procesov.

Nevýhody metódy

Napriek všetkým výhodám má metóda ELISA aj nevýhody. Hlavnou nevýhodou je, že kedyvýskumný lekár musí mať o tejto chorobe vopred predpoklad.

Pri diagnostike infekčných chorôb neexistuje žiadny spôsob, ako náhodne nájsť patogén a určiť jeho vlastnosti enzýmového imunotestu. Test indikuje iba prítomnosť protilátok v krvi pacienta. Navyše je to dosť nákladná analýza.

Prepis analýzy

Výsledkom kvalitatívneho testu ELISA bude buď prítomnosť protilátok, alebo ich neprítomnosť v krvi. Ak sa vykonáva kvantitatívna analýza, potom môže byť koncentrácia protilátok vyjadrená buď číselnou hodnotou, alebo určitým počtom znakov +.

Okrem toho ukazovatele ako:

  • IgM;
  • IgA;
  • IgG.

Indikátor IgM indikuje priebeh akútneho infekčného procesu v tele. Jeho úplná absencia môže naznačovať neprítomnosť pôvodcu ochorenia alebo jeho prechod do chronického štádia.

laboratórne testy metódou IF
laboratórne testy metódou IF

Hodnota IgA s negatívnym testom IgM naznačuje chronickú alebo latentnú infekciu. Súčasná prítomnosť IgM a IgA naznačuje, že ochorenie je v akútnom štádiu. Prítomnosť IgG indikuje prechod choroby do chronického štádia alebo úplné uzdravenie a rozvoj imunity.

Teraz existujú špeciálne testy ELISA, ktoré si môžete urobiť sami.

Odporúča: