Metóda predimplantačnej genetickej diagnostiky slúži na posúdenie zdravotného stavu embrya získaného oplodnením in vitro pred implantáciou do dutiny maternice. Metóda umožňuje nielen vybrať si zdravé budúce dieťa, ale aj zvýšiť šancu na otehotnenie. Táto technika je široko používaná na všetkých svetových klinikách zaoberajúcich sa oplodnením in vitro.
Všeobecné pojmy
Preimplantačná genetická diagnostika vám umožňuje vykonať komplexné vyšetrenie a vylúčiť prítomnosť chromozomálnych abnormalít vo všeobecnosti alebo akejkoľvek konkrétnej odchýlky. V poslednej dobe súbežne so skorými defektmi prebieha skríning génov, ktoré môžu vyvolať vznik nádorov v dospelosti (vaječníky, črevá, prsníky).
V prípade prenášačky genómových chorôb na matkinej strane sa ešte pred oplodnením vykonáva biopsia niekoľkých polárnych teliesok vajíčka. Popísané metódy sú alternatívou k včasnej prenatálnej diagnostike, ktorá umožňuje varovať pred potratom, ak má plod náhle genetické patológie.
Preimplantačná genetická diagnostika vám umožňuje určiť pohlavie budúceho bábätka už v procese skríningu. Používa sa na zabránenie vzniku rodovo podmienených anomálií.
Ako sa dedia genetické choroby
Rozlišujte medzi dedičnými patológiami, ktoré vznikli podľa dominantného, recesívneho a x-viazaného typu.
| Typ dedenia | Funkcie | Riziko, že budete mať choré dieťa |
| Dominantné | Jeden z partnerov má jeden chybný gén, ktorý je dominantný v ich páre | 50 % zdedí gén |
| Recesívne | Obaja partneri nesú rovnaký chybný gén, ale majú normálny pár | 50 % sa stane nosičom, 25 % dostane chorobu |
| X-linked | Ženy sú chránené pred patológiou svojou sadou chromozómov a sú výlučne prenášačkami. Muži sa vyznačujú vývojom anomálie | muž má 50% šancu zdediť gén a chorobu, žena má šancu stať sa prenášačom ako jej matka - 50% |
Kto je preverovaný?
Preimplantačná genetická diagnostika (PGD) sa vykonáva v nasledujúcich prípadoch:
- Prítomnosť jednej alebo oboch z páru dedičných chorôb alebo zmien v karyotype. Často aj samotní partnerivedia o svojich problémoch, menej často sa to dozvedia počas skríningu.
- Opakujúci sa potrat. Problémom nie sú anomálie na strane rodičov (tie vôbec nemusia byť), ale genetické mutácie plodu, ktoré spôsobujú potraty.
- Vek osôb podstupujúcich IVF program je starší ako 38 rokov.
- História viac ako 3 neúspešných pokusov IVF.
- Mužská neplodnosť.
- Zaradenie ICSI (intracytoplazmatická injekcia spermií) do programu oplodnenia. Tento proces je plný vývoja genetických abnormalít v embryu.
- História hydatidiformných krtkov.
Funkcie PGD
Výskum v oblasti preimplantačnej genetickej diagnostiky naznačuje, že metóda má právo na existenciu, pomáha diagnostikovať a predchádzať chromozomálnym abnormalitám, vyžaduje si však ďalšie zlepšenie.
Funkcie PGD sú nasledovné:
- Počet potratov pri skríningu je nižší ako bez skríningu;
- v súčasnosti neexistujú dôkazy, ktoré by zvyšovali pravdepodobnosť otehotnenia;
- existuje možnosť falošného výsledku: embryo je zdravé, ale výsledok vykazuje odchýlky, embryo je choré, ale štúdia hovorí niečo iné (5-10 % prípadov).
Preimplantačná genetická diagnostika (blastomérové vyšetrenie)
Po dohode o mimotelovom oplodnení vyhodnotí špecialista na reprodukciu potrebuPGD pre manželský pár. Ak je to uvedené, partneri môžu s postupom súhlasiť alebo ho odmietnuť. Ďalej je podpísaný dokument potvrdzujúci povolenie uskutočniť prieskum.
Na tretí deň po oplodnení embrya genetik odoberie jednu z vytvorených blastomérových buniek na analýzu. Predpokladá sa, že to nemá žiadne dôsledky pre plod, pretože všetky bunky sú vzájomne zameniteľné.
Špecialista vykonáva výskum v jednej z predtým vybraných oblastí: štúdium štruktúry bunky pod špeciálnym fluorescenčným mikroskopom, testovanie DNA pomocou metódy polymerázovej reťazovej reakcie na určenie prítomnosti mutácie.
Na základe výsledku sa embryá s abnormalitami nepoužijú v procese implantácie. Vybrané zdravé a kvalitné. Potom sa jeden alebo viac z nich prenesie do maternice matky.
Keď dôjde k biopsii polárneho tela, vyšetrí sa chromozómová sada matky. Vykonáva sa v prípade, že sa pozdĺž ženskej línie odhalí prítomnosť geneticky podmienenej patológie. Postup vám umožňuje určiť, či je vajíčko zdravé, ktoré sa použije na oplodnenie, bez porušenia jeho štruktúry. Ak sa nezistia žiadne abnormality, môže sa použiť na oplodnenie a prenos do dutiny maternice.
Sú prípady, keď sa skrínujú polárne telá a potom blastoméry. To vám umožní získať spoľahlivejší výsledok. Schému, podľa ktorej sa vyšetrenie vykoná, vyberie odborníkgenetik.
Použité metódy
Numerické a štrukturálne abnormality chromozómov sú určené metódou fluorescenčnej hybridizácie. Táto metóda vám umožňuje špecifikovať sekvenciu DNA bunky. Používajú sa špeciálne DNA sondy, ktoré sú vo svojej štruktúre komplementárnymi miestami pre zóny blastomérovej DNA.
Sonda obsahuje nukleotid a fluorofór (molekula schopná fluorescencie). Po interakcii cieľovej DNA s DNA sondou sa vytvoria osvetlené oblasti, ktoré sú pozorované pod fluorescenčným mikroskopom.
Použite aj metódu PCR (polymerázová reťazová reakcia). Spočíva v kopírovaní úseku DNA pomocou enzýmov za určitých laboratórnych podmienok.
Diagnostika aneuploidie
Je to jedna z metód predimplantačnej genetickej diagnostiky, ktorá umožňuje zistiť prítomnosť numerických chromozomálnych abnormalít (identifikovať nadbytočné alebo chýbajúce chromozómy).
Genetický materiál pozostáva zo 46 chromozómov, z ktorých polovicu dáva otec a druhú polovicu matka. Ak embryo dostane ďalší chromozóm, nazýva sa to trizómia a strata akéhokoľvek chromozómu sa nazýva monozómia. Tieto chyby môžu mať za následok:
- nedostatok implantácie embrya;
- potrat;
- dedičné patológie (Downov syndróm, Klinefelterov syndróm, Shereshevsky-Turnerov syndróm).
Mužská neplodnosť a vek párusú častými faktormi vo vývoji takýchto anomálií.
PGD monogénnych patológií
Preimplantačná genetická diagnostika embryí s cieľom určiť prítomnosť monogénnych chorôb sa vykonáva v rodinách, kde bola zistená prítomnosť dedičných anomálií. Ak už pár má dieťa s homogénnou chorobou, príležitosť porodiť ďalšie choré dieťa sa niekoľkonásobne zvyšuje.
Príčinou je porušenie sekvencie chromozómov v určitom úseku DNA. Tieto choroby zahŕňajú:
- cystická fibróza;
- adrenogenitálny syndróm;
- fenylketonúria;
- hemofília;
- kosáčikovitá anémia;
- Wernig-Hoffmanov syndróm.
Výhody a riziká metódy
Preimplantačná genetická diagnostika, ktorá sa považuje za nejednoznačnú, má v oblasti prenatálneho skríningu určité výhody:
- do maternice sa prenášajú iba kvalitné a zdravé embryá;
- znižuje riziko narodenia dieťaťa s genetickými abnormalitami;
- znížiť riziko potratu na polovicu;
- zníženie rizika viacpočetného tehotenstva o polovicu;
- 10 % väčšia šanca na implantáciu embrya;
- 20 % zvýšenie šance na úspešné narodenie bábätka.
Riziko neúmyselného poškodenia embrya počas PGD je 1%. Pravdepodobnosť chybného výsledku je 1:10, navyše 3% šanca, že embryo s akoukoľvek anomáliou bude hodnotené ako zdravé.
Pravdepodobnosť, že zdravé embryo bude maťodchýlky - 1:10. Šanca 1:5, že prenos embryí do dutiny maternice bude zrušený kvôli zisteným anomáliám v každom z nich.
Kontraindikácie
Preimplantačná genetická diagnostika (PGD), ktorej dôsledky pre embryo neboli jasne identifikované, má niekoľko kontraindikácií:
- fragmentácia embryí viac ako 30 % (za normu sa považuje tvorba fragmentov do 25 %);
- prítomnosť viacjadrových blastomérov v embryu;
- embryo má na tretí deň svojho vývoja menej ako 6 blastomér.
Bezpečnosť metódy
Diagnostika sa vykonáva v ranom štádiu vytvárania budúceho organizmu, keď sú všetky jeho bunky pluripotentné, čiže z každej môže vzniknúť plnohodnotný zdravý organizmus.
Všetky prebiehajúce kroky PGD nezaťažujú embryo, plod a nenarodené dieťa. Po prijatí vzorky na výskum sa táto pripraví špeciálnym spôsobom. Bunky sa umiestnia na podložné sklíčko, na ktorom sú fixované, alebo do tlmivého roztoku.
Cena postupu
Preimplantačná genetická diagnostika, ktorej cena sa pohybuje od 50 do 120 tisíc rubľov, na prvý pohľad vyzerá ako drahá manipulácia. Zdravie a liečba dieťaťa s geneticky podmienenými patológiami však budú stáť oveľa viac.
Procedúra poskytuje všetky výhody oproti ženám, ktorým sa podarilo počať dieťa prirodzenespôsobom, keďže takáto diagnostická metóda nie je pre nich dostupná. Predimplantačná genetická diagnostika, ktorej cena je v porovnaní so samotným mimotelovým oplodnením zanedbateľná, slúži len ako doplnok k všeobecnému programu, ktorý umožňuje nielen vydržať a porodiť, ale aj vychovať zdravé dieťa.
