V článku sa zamyslite nad tým, čo to je - PCR diagnostika? Ľudský papilomavírus (HPV) je dnes veľmi bežnou chorobou, ktorá sa vyskytuje v chronickej forme a je plná častých recidív. Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je najmodernejšou metódou diagnostiky papilomavírusu. Táto metóda sa považuje za veľmi spoľahlivú a pomáha identifikovať nielen prítomnosť tohto vírusu v ľudskom tele, ale aj jeho množstvo a rozmanitosť. PCR analýza na HPV je citlivá aj na neaktívne formy vírusu, u ktorých nie sú žiadne vonkajšie prejavy vo forme genitálnych bradavíc a papilómov.
Na čom je metóda založená?
Na základe štúdie DNA pacienta s cieľom zistiť prítomnosť cudzích zložiek v tomto reťazci. Skladá sa zo štyroch nukleotidov, ktoré sú usporiadané v špecifickej sekvencii. Ak sa vírus dostane do tela, dôjde k zmene poradia v tomto reťazci, čo umožňuje starostlivo sledovať aktivitu aj tých najnepodstatnejších cudzích častíc. Technika výskumu HPV PCR sa vykonáva pomocou vírusových častíc, ktoré určujú rýchlosť delenia buniek.
Čo definuje výskum?
Tento diagnostický princíp vám umožňuje sledovať aktivitu HPV nielen v pasívnom stave, ale aj počas inkubačnej doby. Diagnostika PCR určuje:
- prítomnosť HPV v tele;
- kmene, ktoré infikujú pacienta;
- kvantitatívny obsah v tele.
Papilomavírus infikoval väčšinu ľudí, ale silná imunitná obrana potláča jeho prejavy a neumožňuje množenie. Kvalitatívne zistenie HPV teda nemôže byť vždy opodstatnené, keďže nie je racionálne, ak sú v tele prítomné vírusové častice, ale ich dopad je taký minimálny, že to človeku nijako neublíži. Kvalitatívna analýza ukazuje pozitívny výsledok, čo človeka často mätie.
Kvantitatívna metóda
Na diagnostiku sa preto najčastejšie používa kvantitatívna metóda, ktorá umožňuje sledovať počet vírusových agensov v tele a určiť, aká nebezpečná je ich aktivita. Okrem toho je dôležité určiť rôzne kmene HPV. Delia sa podľa stupňa onkogenity: niektoré sa môžu stať hlavným faktorom vzniku onkologických ochorení, iné sú absolútne bezpečné a môžu spôsobiť len niektoré kozmetické problémy.
Každá individuálna situácia si vyžaduje individuálny prístup,preto je vhodné pred podstúpením tohto laboratórneho testu konzultovať s kvalifikovaným odborníkom, ktorý vám povie, ako a na ktoré kmene by bolo najlepšie testovať, berúc do úvahy stav pacienta a klinické príznaky.
Indikácie pre vedenie
Najvýznamnejším dôvodom na podstúpenie testu PCR na HPV je prítomnosť bradavíc na tele.
Infekcia týmto vírusom je možná len od osoby. Po preniknutí do krvného obehu sa patogénny mikroorganizmus začne množiť v horných vrstvách kože, čo vedie k rozvoju charakteristických prejavov - vzniku kondylómov alebo papilómov. Keďže toto ochorenie je pomerne časté a vyskytuje sa u takmer 80 % populácie, pravdepodobnosť, že sa ním nakazíte, je extrémne vysoká. Papilomavírusy sa prenášajú prostredníctvom:
- nechránený styk;
- pri bozkávaní;
- pri pôrode dieťaťa od mamy;
- v domácnosti;
- s blízkym kontaktom s pokožkou.
Hlavnými indikáciami pre krvný test a PCR náter na HPV sú kožné symptómy tohto ochorenia, ktoré vyzerajú ako visiace bradavice na tenkej nitkovitej stopke. Aj keď takéto kondylómy nie sú na koži pozorované, vírus môže byť stále prítomný v krvi, ale jeho priebeh bude asymptomatický. Ak je pacientovi diagnostikovaná infekcia papilomavírusom 18. a 16. podtypu, odporúča sa, aby bol pravidelne kontrolovaný odborníkmi ako je gynekológ a urológ, absolvoval diagnostické postupy a bol testovaný na HPV, pretožeLen včasnou diagnózou je možné zabrániť vzniku určitých druhov rakoviny.
Typy techník
V rámci PCR diagnostiky HPV boli vyvinuté štyri hlavné testovacie metódy, z ktorých každá má určité špecifické vlastnosti a je predpísaná s prihliadnutím na stav chorého človeka. Na výber najlepšej metódy je potrebná odborná rada. Takže štyri spôsoby:
- Kvalitatívna metóda, ktorá sa používa na vyvrátenie alebo potvrdenie prítomnosti vírusu v tele. Jeho hlavnou nevýhodou je neschopnosť určiť typ kmeňa HPV (len 14-21 typov). Najčastejšie sa kvalitatívna metóda používa súčasne s inými metódami na detekciu papilomavírusu. Výsledok sa hlási pomocou dvoch hodnotení: „nenájdené“alebo „zistené“. To znamená, že táto technika buď uvádza prítomnosť cudzej DNA, alebo naznačuje jej neprítomnosť.
- Genotypizácia je metóda, ktorá dokáže určiť prítomnosť vírusu v ľudskom tele a určiť jeho rozmanitosť. Táto metóda sa používa v prípadoch, keď je potrebné zistiť, či DNA vírusu zostane po liečbe alebo je pozorovaný relaps v dôsledku novej infekcie. Genotypizácia pomáha vyhodnotiť účinnosť terapie určením typu HPV. Ak ide o rovnaký kmeň, na ktorý bol pacient liečený, liečba bola neúspešná. Ak analýza preukáže prítomnosť iného typu HPV, môže to naznačovaťreinfekcia.
- Kombinovaná metóda, čo je vysoko špecializovaná diagnostická metóda založená na kombinácii kvalitatívnej detekcie a detekcie 16 kmeňov pomocou genotypizácie. Výsledok môže byť reprezentovaný 3 odpoveďami: „kmeň 16 zistený“, „nezistený“a „detegovaný HPV typ 16 vrátane“. Táto metóda sa používa, keď máte podozrenie na prítomnosť typu papilomavírusu, ktorý môže spôsobiť rakovinu krčka maternice u žien.
- Kvantitatívna PCR metóda pre HPV s vysokým onkogénnym rizikom, ktorá umožňuje určiť hladinu vírusu v krvi a sledovať jeho vývoj. Považuje sa za najinformatívnejšiu, pretože vám umožňuje určiť závažnosť patologického procesu, na základe ktorého sa vyberie správna liečba. Technika je založená na stanovení počtu buniek vírusu v rámci skúmaných 100 tisíc. Ak je ich celkový počet vyšší ako 5, naznačuje to vysokú koncentráciu papilomavírusu v tele, čo zvyšuje pravdepodobnosť rakovinových buniek. Ak je množstvo menšie ako 3, koncentrácia sa považuje za zanedbateľnú.
Ako sa pripraviť a absolvovať test?
Krv sa môže odoberať ako biomateriál pre HPV, ale najčastejšie sa odoberajú sekréty z močovej trubice u mužov a z krčka maternice u žien.
Špeciálna príprava na PCR na HPV sa nevyžaduje. Hlavnou podmienkou je nemočiť niekoľko hodín pred zákrokom. Okrem toho je vhodné nemať pohlavný styk 2-3 dni pred štúdiom a niepiť alkoholické nápoje. Zároveň nezabúdajte na procedúry intímnej hygieny.
Pre mužov
Muži si urobia tampón – hlava penisu a močová trubica sa ošetria fyziologickým roztokom. Špecialista používa špeciálnu kefku, ktorá sa zavedie do močovej trubice asi o 4 cm. Biologický materiál sa odoberie miernym otáčaním, vloží sa do skúmavky a odošle sa do laboratória na výskum. Zároveň ho môžete skladovať maximálne 2 dni od momentu vyzdvihnutia.
Ženy
Rozter na PCR analýzu na HPV u žien sa vykonáva nasledovne: sterilný roztok sa aplikuje na krčok maternice, potom sa kefkou odoberie tampón z cervikálneho kanála. Zariadenie sa vloží do hĺbky približne 1 cm, potom lekár rotačnými pohybmi zoškrabuje steny kanála. Biologický materiál sa vloží do špeciálnej skúmavky, kde zostane asi 15 sekúnd. Špecialista ho v ňom utrie o steny a potom ho vyberie. Potom sa obsah skúmavky odošle na laboratórne testovanie.
Správny odber vzoriek materiálu na výskum je kľúčom k úspešnej diagnóze a získaniu spoľahlivého výsledku. Ak je súčasne narušená sterilita a cudzie mikroorganizmy preniknú do skúmavky, počas analýzy môže byť rozpoznaný vírus, ktorý v skutočnosti nie je v tele pacienta. Chyba sa môže vyskytnúť aj v dôsledku malého množstva materiálu odobratého na výskum.
Kde vziať PCR na HPV, veľa ľudí sa zaujíma. Testy je možné vykonať v ktorejkoľvek medicíneklinika alebo laboratórium, napríklad v "Invitro" alebo "Hemotest".
Výhody metódy
PCR je jednou z hlavných diagnostických metód a v súčasnosti zostáva medzi lekármi najobľúbenejšia. Táto štúdia sa vykonáva nielen na detekciu HPV, ale umožňuje vám odhaliť aj iné patologické mikroorganizmy, ktoré sa môžu prenášať sexuálnym kontaktom. Takáto analýza pomáha diagnostikovať skryté infekcie, hepatitídu atď. PCR test na HPV má oproti iným metódam zisťovania chorôb množstvo výhod. Tieto výhody sú:
- Vysoká špecifickosť. Analýza pomáha pri štúdiu zozbieraného biomateriálu s vysokou pravdepodobnosťou oddeliť stopy cudzej DNA.
- Vysoký výkon. Štúdia PCR je automatizovaný proces, ktorý pomáha uskutočniť štúdiu priamo v deň analýzy. Táto rýchlosť umožňuje človeku nestarať sa o výsledky na dlhú dobu a dostať ho do rúk za pár dní.
- Vysoká citlivosť. Testovanie umožňuje skúmať aktivitu vírusov aj počas inkubačnej doby, kedy sú ich koncentrácie veľmi nízke. To pomáha predchádzať vzniku patologického procesu a začať včasnú liečbu.
- Možnosť vykonania viacerých analýz naraz. Na základe jedinej odobranej vzorky krvi je možné vykonať diagnostiku na určenie viacerých ochorení naraz. Môžete napríklad súčasneidentifikovať pôvodcu kvapavky a chlamýdií. Zároveň tento postup nebude môcť negatívne ovplyvniť spoľahlivosť výsledku.
Chyby štúdie
Napriek veľkej popularite a informatívnosti tejto analýzy existujú niektoré negatívne aspekty diagnostiky PCR pre HPV. Hlavnou z nich je pravdepodobnosť falošne pozitívnych výsledkov. K tomu dochádza, keď už bola terapia vykonaná, infekcia bola zničená, ale mŕtve bunky vírusu stále zostávajú v tkanivách tela. Obnova buniek trvá určitý čas. Ak vykonáte štúdiu skôr ako 2-3 mesiace po liečbe, PCR môže ukázať pozitívny výsledok. Technika nezaznamenáva žiadne rozdiely, keďže je zameraná na hľadanie vírusovej DNA, ktorú možno nájsť aj v už odumretých bunkách. To prispieva k falošne pozitívnym výsledkom. Tejto situácii sa dá predísť, ak sa laboratórny test vykoná v časovom rámci stanovenom ošetrujúcim lekárom.
Prepis
Čo ukáže dešifrovanie PCR pre HPV?
Lekár by mal interpretovať výsledky testu. Ale je tiež dôležité, aby si pacient uvedomil štruktúru výsledkového listu. Ak analýza ukazuje „DNA nebola zistená“, potom v krvi nie je žiadny papilomavírus. Ak je indikátor Lg 5 alebo viac, znamená to jeho vysokú koncentráciu v krvi, Lg 3-5 - významné množstvo, menej ako 3 - nevýznamné množstvo.
Falošná negatívna analýza
Tiež,môže dôjsť k falošne negatívnej analýze. Nastane, ak:
- zozbieraný biologický materiál bol nesprávne skladovaný alebo prepravovaný;
- boli porušené sterilné podmienky a do prijatej krvi pacienta sa dostali iné mikroorganizmy;
- kvôli nevhodnosti činidiel.
Pre elimináciu možnosti falošne negatívnych výsledkov je potrebné na túto analýzu vybrať schválené laboratórium s vysokokvalifikovaným personálom.
Podrobne sme skúmali, ako a prečo sa vykonáva diagnostika PCR. Čo to je, je teraz jasné.
